項目簡介：   　　

　　本項目屬于生物科學中的病毒學研究領域。主要針對嚴重危害國民經(jīng)濟發(fā)展、社會和諧穩(wěn)定和人類生命健康的重大烈性傳染性人獸共患病，特別是禽流感、SARS、狂犬病等病毒性人獸共患病，開展病原基礎和應用基礎層面的相關研究。

　　項目總體科技內(nèi)容是建立高效、系統(tǒng)、共享的病原－載體－基因表達－模型測試－快速診斷技術平臺，夯實我國人獸共患病綜合防制基礎。具體為：從全國各地收集臨床病料，分離鑒定禽流感、SARS、狂犬病等多種重要人獸共患病病原，開展全國范圍內(nèi)病原生態(tài)學與流行病學調查，進行生物特性鑒定，分子背景分析和遺傳變異規(guī)律研究，建立病原毒株庫；進行多種病毒主要保護性抗原基因和代表株全基因組克隆或感染性克隆，建立基因儲備庫，并進行生物信息學分析；構建大腸桿菌、酵母、桿狀病毒、痘苗病毒、雞痘病毒和DNA等多種真原核表達系統(tǒng)，表達功能基因或構建重組體，進行結構、功能、免疫、模型和機制研究；建立了檢測基因、抗原、抗體快速診斷方法；構建了多種單價、多價、多表位及偶聯(lián)佐劑候選基因工程疫苗，進行了臨床實驗免疫研究。

　　項目科學價值：在國內(nèi)早期啟動了重大、烈性人獸共患傳染病病原基礎及診斷和防治研究，率先將"動物的健康就是人類的安全"理念融入科學研究中，從理論上探究了人－禽(哺乳動物)病原生態(tài)分布相關性、病原基因組進化變異特點、不同功能基因用于診斷或疫苗研制的可行性等問題，從技術上突破了基因表達與診斷檢測瓶頸，建立了毒株庫、基因庫、系列基因表達系統(tǒng)平臺，探索了構建安全、廉價基因工程疫苗可行模式，建立了快速診斷方法，為我國人獸共患病早期預警和綜合防控奠定堅實基礎，提供有效技術儲備。

　　本研究獲得國家973、863、科技攻關、自然基金重點、面上及省市科技發(fā)展計劃等15個項目資助，發(fā)表論文83篇， 其中SCI收錄2篇，EI收錄10篇，論文他引96次，獲國家發(fā)明專利1項，并為軍隊重點學科和軍隊重點實驗室建設作出了重要貢獻。

主要發(fā)現(xiàn)點：  1.通過對我國雞痘病毒進行基因組背景分析，克隆非必需區(qū)基因、人工設計合成啟動子，在國內(nèi)外率先自主構建了單向和雙向重組雞痘病毒表達載體，不僅為我國重組載體研究提供了新思路，而且為開發(fā)研制新型、高效、安全的禽用疫苗、動物疫苗以及其他非禽屬疫苗開辟了全新領域，建立了基礎平臺。（分子病毒學，代表論文編號2）

2.應用自主構建的雞痘病毒真核表達系統(tǒng)，首次構建了表達狂犬病糖蛋白基因、口蹄疫病毒P1-2A基因、共表達新城疫病毒F基因和傳染性法氏囊病病毒VP0基因的單價和多價重組雞痘病毒，并取得了國家生物安全委員會批文，對新城疫、傳染性法氏囊病及口蹄疫的防制具有重要指導意義和實用價值，國內(nèi)外未見相關報道。（分子病毒學，代表論文編號3、4）

3. 在國內(nèi)外率先自主構建了重組痘苗病毒表達載體，解決了國內(nèi)外痘苗病毒載體不能高效表達的難題，并首次應用痘苗病毒表達載體構建了狂犬病基因工程候選疫苗。（分子病毒學，代表論文編號1、5）

4.首次在我國東北地區(qū)分離出新城疫自然弱毒株，對該毒株進行了系統(tǒng)的生物學和分子生物學特性鑒定，并以此為基礎創(chuàng)制了新城疫弱毒候選疫苗，其具有免疫原性好、使用方便、價格低等特點，對于我國養(yǎng)雞業(yè)大量分散養(yǎng)殖的國情，該弱毒疫苗將對控制和預防新城疫的發(fā)生具有重要意義。（獸醫(yī)微生物學，代表論文編號6）

5.在國內(nèi)外首次提出應用新城疫病毒結構基因而不是全病毒構建安全的治療性核酸疫苗，通過建立細胞模型，對其信號轉導、分子致病機制及細胞毒性進行了研究，結果表明該侯選疫苗對細胞毒性低，且能誘發(fā)強的細胞免疫反應，并獲得專利1項。（分子病毒學，代表論文編號7、8）

6.根據(jù)吉林省人群分離SARS冠狀病毒基因組背景，創(chuàng)制了抗SARS病毒N蛋白的重組核酸侯選疫苗，為SARS疫苗的研究提供了一條新途徑。（分子病毒學，代表論文編號9）

7.在我國早期啟動大腸桿菌、桿狀病毒、畢赤酵母等表達體系，進行了禽流感、SARS等病毒的基因組蛋白表達與調控機制研究，為疫病早期預警、快速診斷和綜合防控積累了理論與技術平臺。（分子病毒學，代表論文編號10）

主要完成人：

1.  金寧一

　　進行所有課題的立項、前期設計、過程跟蹤監(jiān)督以及各個環(huán)節(jié)的的介入和參與，主要完成具有自主知識產(chǎn)權的雞痘病毒表達載體平臺的建設。投入該項研究的工作量占本人工作量的80%，對1、2、3、4、5、6、7發(fā)現(xiàn)點做出貢獻，10篇代表性論文的通訊作者。

2.  金擴世

　　參加有關新城疫、SARS、口蹄疫等項目的前期設計、實驗指導，主要完成新城疫病毒、SARS冠狀病毒分離鑒定、基因克隆表達，新城疫、口蹄疫基因工程疫苗的應用等。對1、2、4、7發(fā)現(xiàn)點做出貢獻，投入本項研究的工作量占本人工作量的80%，代表性論文3、6、10的作者。

3.  魯會軍

　　參加有關禽流感、SARS、口蹄疫等項目的前期設計、實驗指導，主要完成禽流感病毒、口蹄疫病毒分離鑒定、基因克隆表達，禽流感、口蹄疫快速診斷試劑及基因工程疫苗的研制及應用等。對2、4、6、7發(fā)現(xiàn)點做出貢獻，投入本項研究的工作量占本人工作量的80%，代表性論文10的第一作者。

4.   李昌

　　參加有關口蹄疫、禽流感等項目的前期設計，主要完成口蹄疫及禽流感基因工程疫苗研制與應用等。對2、6、7發(fā)現(xiàn)點做出貢獻，投入本項研究的工作量占本人工作量的50%，代表性論文2的作者。

5.  李霄

　　參加有關新城疫、禽流感等項目的研究，主要完成新城疫病毒分離鑒定、基因克隆表達，新城疫病毒抗腫瘤研究等。對2、5、7發(fā)現(xiàn)點做出貢獻，投入本項研究的工作量占本人工作量的50%，代表性論文7的第一作者。

10篇代表性論文：

1.   Construction of vaccinia virus A-type inclusiom body protein, tandemly repeated mutant 7.5kDa protein,and hemagglutinin gene promoters support high levels of expression/ Arch Virol

2.   Sequence analysis of a 7.3 Kb BamHI genomic fragment of fowlpox virus strain 282E4/Chinese Science Bulletin

3.   口蹄疫病毒二價DNA疫苗的構建及實驗免疫研究/高技術通訊

4.   共表達新城疫病毒F基因、傳染性法氏囊病毒VP0基因等重組雞痘病毒的抗原性和免疫原性/中國獸醫(yī)學報

5.   不同啟動子對重組痘苗病毒中的表達狂犬病病毒糖蛋白基因的影響/中國獸醫(yī)學報

6.   新城疫病毒弱毒株分子生物學特性的研究/中國預防獸醫(yī)學報

7.   聯(lián)合應用凋亡素基因、新城疫病毒HN基因及IL-18 基因對黑色素瘤的抑制效應研究/高技術通訊

8.   新城疫病毒HN基因與雞貧血病毒VP3 基因對裸鼠荷HCT腫瘤的治療/中國腫瘤生物治療雜志

9.   SARS病毒核衣殼蛋白的表達與鑒定/高等學校化學學報

10.  口蹄疫病毒3D基因在重組桿狀病毒中的表達及檢測/中國預防獸醫(yī)學報